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胎牛血清沉淀了怎么辦?

更新時間:2023-09-26  |  點擊率:328

一般情況下,血清沉淀不會影響細胞培養效果,但是出于一致性等方面的考慮,還應盡可能減少在使用或運輸過程中,人為因素導致的血清沉淀。

1、正確的運輸溫度:運輸過程中,要嚴格-20℃低溫,避免反復凍融。

2、使用正確的融化方法:在使用時,正確的解凍方法也很重要,這里推薦使用國際上通用的“三步法"解凍。

操作

溫度

100ml

500ml

1000ml

第1步

室溫

35 min

90 min

100 min

或15-20℃水浴

5 min

18 min

20 min

第2步

20℃水浴

15 min

25 min

30 min

第3步

37℃水浴

20 min

35 min

45 min


需要注意的是,如果血清是儲存在-80℃冰箱中,正式解凍前應先轉移至-20℃冰箱中過渡。一次解凍后,分裝至無菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。

3、使用正確的儲存方式:長期儲存在 2-8℃或在室溫下放置時間過長,都會引起沉淀,建議配制好的培養基在4℃冰箱中存放不要超過7天,血清分裝好后-20℃儲存。

4、特殊的處理:γ射線照射與熱滅活也容易引起沉淀析出,因此要注意射線照射劑量以及熱滅活方法(40℃水浴加熱20分鐘即可)。常規實驗中用到的胎牛血清,無需熱滅活。

那么,如果想去除細胞培養過程中,血清中沉淀,又該如何操作呢?

如果要除去血清中的沉淀,可以將血清分裝至無菌離心管中,大約400g 離心,留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞,因此不建議用過濾的方法。

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